在規(guī)定的條件下，微生物分解水中的某些可氧化的物質(zhì)，特別是分解有機(jī)物的生物化學(xué)過(guò)程消耗的溶解氧。五日生化需氧量（BOD5）通常情況下是指水樣充滿密閉的溶解氧瓶中，在(20±1)℃的暗處培養(yǎng)5d±4h，分別測(cè)定培養(yǎng)前后水樣中溶解氧的質(zhì)量濃度，由培養(yǎng)前后溶解氧的質(zhì)量濃度之差，計(jì)算每升樣品消耗的溶解氧量。

地表水、工業(yè)廢水和生活污水

1. 非稀釋法：BOD5不大于6mg/L，樣品中有足夠微生物。

2. 非稀釋接種法：BOD5不大于6mg/L，樣品中無(wú)足夠微生物。

3. 稀釋法：BOD5大于6mg/L，樣品中有足夠微生物。

4. 稀釋接種法：BOD5大于6mg/L，樣品中無(wú)足夠微生物。

1. 質(zhì)控樣品

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2. 接種液

可購(gòu)買接種微生物用的接種物質(zhì)或選擇未受工業(yè)廢水污染的生活污水、含有城鎮(zhèn)污水的河水或湖水、污水處理廠的出水。

3. 鹽溶液

磷酸鹽緩沖溶液，硫酸鎂溶液，氯化鈣溶液，氯化鐵溶液

4. 葡萄糖-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液

將葡萄糖（C6H12O6，優(yōu)級(jí)純）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH，優(yōu)級(jí)純），在130℃干燥1h，各稱取150mg溶于1000mL水中，此溶液的BOD5為(210±20)mg/L，現(xiàn)用現(xiàn)配。

5. 稀釋水

在5~20L的玻璃瓶中加入一定量的水，控制水溫在(20±1)℃，曝氣使稀釋水中的溶解氧達(dá)到8mg/L以上。使用前每升水中加入上述四種鹽溶液各1.0mL，混勻，20℃保存。

6. 接種稀釋水

每升稀釋水中加入適量接種液，接種稀釋水pH值為7.2，空白試樣測(cè)定BOD5應(yīng)小于1.5 mg/L。

接種稀釋水帶標(biāo)試樣測(cè)定：取20 mL葡萄糖-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液于稀釋容器中，用接種稀釋水稀釋至1000mL，BOD5測(cè)定結(jié)果應(yīng)在180~230mg/L范圍內(nèi)。

7. 稀釋倍數(shù)的確定

按照有證標(biāo)物給定的樣品濃度范圍和HJ 505-2009要求，樣品稀釋的程度應(yīng)使消耗的溶解氧質(zhì)量濃度不小于2mg/L，培養(yǎng)后樣品中剩余溶解氧質(zhì)量濃度不小于2 mg/L，且試樣中剩余的溶解氧的質(zhì)量濃度為開始濃度的 1/3~2/3為最佳。當(dāng)不能準(zhǔn)確地選擇稀釋倍數(shù)時(shí)，一個(gè)樣品做2~3個(gè)不同的稀釋倍數(shù)。

稀釋倍數(shù)的確定可先根據(jù)總有機(jī)碳（TOC）、高錳酸鹽指數(shù)（IMn）或化學(xué)需氧量（CODCr）的值及其與BOD5的比值（表一）估計(jì)BOD5的期望值，然后按表二確定稀釋倍數(shù)。

表一

（來(lái)源：HJ 505-2009）

表二

（來(lái)源：HJ 505-2009）

8. 測(cè)定結(jié)果

（來(lái)源：HJ 505-2009）

結(jié)果報(bào)告中應(yīng)注明：樣品是否經(jīng)過(guò)過(guò)濾、冷凍或均質(zhì)化處理。

1. 溫度

水溫和溶解氧成反比，水溫低時(shí)溶解氧高，水溫高時(shí)溶解氧低^[1]。測(cè)定時(shí)，必須嚴(yán)格控制樣品溫度為(20±1)℃，以確保試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

2. pH值

pH值對(duì)微生物的活性有較大影響，過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響分析結(jié)果，樣品pH值應(yīng)在6~8范圍內(nèi)，最佳為7.2^[2]。

3. 稀釋倍數(shù)

稀釋倍數(shù)偏小，樣品的測(cè)定結(jié)果容易偏低，稀釋倍數(shù)過(guò)大，結(jié)果容易偏高^[3]。

4. 硝化抑制劑

若試樣中含有硝化細(xì)菌，有可能發(fā)生硝化反應(yīng)，需在每升試樣中加入2 ml丙烯基硫脲硝化抑制劑。

5. 余氯和結(jié)合氯

污水處理廠的出水中含余氯和結(jié)合氯，其會(huì)抑制微生物活性，使BOD5的測(cè)定結(jié)果偏低，可加入過(guò)硫酸鈉消除余氯和結(jié)合氯的影響[3]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張麗. 稀釋與接種法測(cè)定五日生化需氧量的影響因素分析[J]. 山西化工, 2023, 43 (11):65-67.

[2] 陳美瑩. 稀釋與接種法測(cè)定五日生化需氧量的影響因素[J]. 山西化工, 2025, 45 (05):110-112.

[3] 朱智慧, 徐錫梅, 章文華, 等. 稀釋接種法測(cè)定五日生化需氧量的影響因素[J]. 凈水技術(shù), 2022, 41(6):170-174, 186.